人抗胰蛋白酶elisa试剂盒实验原理是用纯化的MT抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的MT抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物(TMB)显色。
可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:
1、固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);
2、酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);
3、酶反应的底物。
试剂准备:
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,依次倍比稀释成不同的梯度,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3、浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
人抗胰蛋白酶elisa试剂盒的保温:
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。抗原抗体反应4℃更为*,在免疫测定中多使反应在冰箱中夜,以形成多的沉淀。