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动物ELISA试剂盒操作步骤如下

  • 发布日期:2022-07-06      浏览次数:145
    •    动物ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。以这些特点在上得到了广泛的应用,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。广泛用于定量检测各种分子,包括细胞因子,趋化因子,生长因子和蛋白酶等。
        
        动物ELISA试剂盒操作步骤如下:
        一、样品准备:
        1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
        2.用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
        3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
        
        二、检验方法:
        1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
        2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
        3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
        4.混匀,置37℃反应30分钟。
        5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
        6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
        7.洗涤,同步骤5。
        8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
        9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
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